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本糖業文物館展示項目有視聽播放與展場導覽解說兩部分，就各項展示內容說明如下：一、視聽播放：播放影片介紹虎尾糖廠製糖過程、310甘蔗育種成功對台灣糖業重大影響等，讓參訪者對台灣糖業有初步認識。二、展場導覽解說：由專責人員為訪客一一導覽解說：1.以年譜文字敘述糖業事跡。2.舊相片呈現台灣糖業影像。3.糖業文物展示以虎尾糖廠日據時期至近期所保存之文物展示，由專人一一導覽解說電話交換機、農器具、公學校桌椅、五分輕便車、西螺大橋告示牌、防空警報器、分糖棧單及手搖計算機等歷史使用背景，讓訪客能更加回顧過往的點點滴滴。